GIỚI THIỆU VỀ QIAGEN 210212
Qiagen 210212 là bộ kit OneStep RT-PCR thiết kế để thực hiện phiên mã ngược (RT) và PCR trong cùng một ống phản ứng. Cách làm one-step giúp:
Giảm số bước thao tác so với two-step (RT riêng, PCR riêng)
Giảm rủi ro nhiễm chéo do ít mở nắp ống
Tăng tính nhất quán giữa các lần chạy, đặc biệt khi xử lý nhiều mẫu
Điểm quan trọng cần hiểu đúng: đây là bộ kit cho hệ phát hiện endpoint (điểm cuối), nghĩa là sản phẩm PCR được kiểm tra bằng các phương pháp điểm cuối như điện di gel. Bộ kit không phải kit RT-qPCR định lượng theo thời gian thực.
Sản phẩm phục vụ nghiên cứu, không nhằm mục đích chẩn đoán, phòng ngừa hay điều trị bệnh.
THÔNG SỐ KỸ THUẬT QIAGEN 210212
| Hạng mục | Thông số |
|---|---|
| Tên sản phẩm | QIAGEN OneStep RT-PCR Kit (100) |
| Mã sản phẩm (Cat. No.) | 210212 |
| Số lượng phản ứng | 100 phản ứng (mỗi phản ứng 50 µl) |
| Loại phản ứng | RT-PCR một bước (One-step RT-PCR) |
| Hệ thống phát hiện | Endpoint (điểm cuối) |
| Mẫu/Mục tiêu | RNA template |
| Phạm vi lượng RNA đầu vào | 1 pg đến 2 µg |
| Hỗn hợp Mastermix | Không (các thành phần cung cấp riêng để pha) |
| Cơ chế hot-start | Có (HotStarTaq DNA Polymerase) |
| Kích hoạt hot-start | 15 phút ở 95°C (bắt buộc) |
| Thành phần đệm | Dual-cation K⁺ và NH₄⁺, không chứa BSA |
| Hoạt tính enzyme | Phiên mã ngược và hoạt tính 5’ → 3’ exonuclease |
| Multiplex | Single (đơn mục tiêu) |
| Thành phần bộ kit | Enzyme Mix (1 x 200 µl); 5x Buffer (1 x 1 ml); dNTP Mix (1 x 200 µl, mỗi loại 10 mM); 5x Q-Solution (1 x 2 ml); RNase-Free Water (2 x 1.9 ml) |
Bảng so sánh các mã sản phẩm QIAGEN OneStep RT-PCR Kit
Thành phần / Đặc điểm | Mã 210210 (25 rxn) | Mã 210212 (100 rxn) | Mã 210215 (1000 rxn) |
|---|---|---|---|
Số lượng phản ứng | 25 phản ứng (50 µl/rxn) | 100 phản ứng (50 µl/rxn) | 1000 phản ứng (50 µl/rxn) |
Enzyme Mix | 1 x 50 µl | 1 x 200 µl | 2 x 1 ml |
5x RT-PCR Buffer | 1 x 250 µl | 1 x 1 ml | 1 x 10 ml |
dNTP Mix (10 mM) | 1 x 50 µl | 1 x 200 µl | 2 x 1 ml |
5x Q-Solution | 1 x 400 µl | 1 x 2 ml | 1 x 10 ml |
RNase-Free Water | 1 x 1.9 ml | 2 x 1.9 ml | 1 x 40 ml |
ĐẶC ĐIỂM NỔI BẬT CỦA QIAGEN 210212
1. One-step giúp giảm sai số và nhiễm chéo
Với Test Kit Qiagen 210212, RT và PCR nằm chung một tube, giảm thao tác chuyển ống và giảm khả năng lẫn tạp. Đây là lợi thế rõ nhất khi bạn chạy nhiều mẫu, cần workflow gọn và dễ chuẩn hóa SOP.
2. Hệ enzyme tối ưu cho độ nhạy và độ đặc hiệu
Hệ enzyme kết hợp Omniscript và Sensiscript Reverse Transcriptases cùng HotStarTaq DNA Polymerase. Về thực hành, lợi ích thường thấy là:
RT “ăn RNA” tốt hơn ở dải mẫu rộng
PCR ít nền hơn nhờ cơ chế hot-start
3. HotStarTaq hot-start, bắt buộc kích hoạt 95°C trong 15 phút
Bước 95°C 15 phút không phải tùy chọn. Đây là chìa khóa để:
Giảm primer dimer hình thành sớm
Hạn chế khuếch đại không đặc hiệu khi set up ở nhiệt độ phòng
Tăng tín hiệu mục tiêu khi phân tích điểm cuối
4. Q-Solution hỗ trợ khuôn mẫu khó
Q-Solution là phụ gia mạnh cho các trường hợp RNA hoặc vùng mục tiêu “khó kéo”, ví dụ:
Vùng giàu GC
Cấu trúc bậc hai phức tạp
Mẫu có nền khiến phản ứng khó tối ưu
5. Đệm dual-cation K⁺/NH₄⁺: primer bắt cặp đặc hiệu trong dải nhiệt rộng
Hệ đệm K⁺ + NH₄⁺ giúp tăng tính đặc hiệu bắt cặp primer và “dễ thở” hơn khi bạn chưa tối ưu nhiệt độ ủ (annealing) quá sâu. Điểm này rất thực dụng cho phòng lab chạy routine.
ỨNG DỤNG CỦA QIAGEN 210212
Với bản chất one-step endpoint RT-PCR, Hóa chất Qiagen 210212 phù hợp cho các nhóm ứng dụng sau:
Phát hiện virus RNA trong nghiên cứu
Dùng để nhận diện mục tiêu RNA với độ nhạy cao, sau đó đọc kết quả bằng gel hoặc phân tích điểm cuối.Phân tích biểu hiện gen (gene-expression analysis) theo hướng điểm cuối
Phù hợp khi mục tiêu là xác nhận có/không, so sánh tương đối trên gel, hoặc kiểm tra transcript đặc hiệu.RT-PCR từ lượng RNA rất thấp, bao gồm single-cell RT-PCR (theo mô tả ứng dụng bạn cung cấp)
Nhờ dải đầu vào rộng 1 pg đến 2 µg, kit hỗ trợ tốt các bài toán mẫu ít, miễn là workflow tách chiết và chống RNase được kiểm soát.Nghiên cứu chẩn đoán phân tử và biomarker ở mức nghiên cứu
Dùng trong giai đoạn sàng lọc, xác nhận, thiết lập mồi và điều kiện phản ứng trước khi chuyển sang nền tảng định lượng (nếu cần).
CÁCH SỬ DỤNG QIAGEN 210212
1. Chuẩn bị RNA và môi trường thao tác
Thao tác trong điều kiện sạch RNase: găng tay, tip lọc, ống RNase-free.
RNA nên được kiểm tra chất lượng tối thiểu (độ sạch, không bị phân hủy) trước khi chạy.
2. Pha phản ứng theo dạng thành phần rời
Vì không có mastermix sẵn, bạn cần:
Pha hỗn hợp phản ứng từ 5x Buffer, dNTP mix, Enzyme mix, RNase-free water, và thêm Q-Solution khi cần cho mẫu khó.
Ưu tiên pha mastermix cho cả loạt mẫu để giảm sai số pipet.
3. Nhớ bước kích hoạt hot-start bắt buộc
Trong chương trình nhiệt, phải có bước 95°C trong 15 phút để kích hoạt HotStarTaq. Bỏ bước này thường làm tăng nền và giảm tính đặc hiệu.
4. Chạy RT và PCR trong một ống
Sau khi chạy xong, sản phẩm được đọc theo endpoint, phổ biến nhất là điện di gel để xác nhận kích thước băng và tính đặc hiệu.
5. Kiểm soát chất lượng chạy
Để kết quả đáng tin:
Có mẫu âm tính (NTC) để kiểm nền
Có control dương tính để xác nhận phản ứng hoạt động
Nếu nghi nhiễm DNA nền, áp dụng SOP xử lý theo quy trình nội bộ phòng lab
MUA QIAGEN 210212 CHÍNH HÃNG Ở ĐÂU
Nếu bạn cần mua Qiagen 210212 cho workflow one-step endpoint RT-PCR trong phòng thí nghiệm, có thể đặt hàng tại TSLABS theo hướng “đúng mã, đúng điều kiện”:
Xác nhận đúng Cat. No. 210212 và cấu phần kit như bảng thông số
Yêu cầu tư vấn điều kiện vận chuyển, bảo quản và hạn dùng theo lô
Đối chiếu số phản ứng 100 phản ứng (50 µl/phản ứng) để lên kế hoạch vật tư
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.